Bolsa de PD em Metabolismo Energético

Post-Doctoral Fellowship in Energy Metabolism

Nº: 4074

Área de conhecimento: Bioquímica

Field of knowledge: Biochemistry

Nº do processo FAPESP: 2020/06970-5

FAPESP process: 2020/06970-5

Título do projeto: Regulação do metabolismo energético por transporte de íon de cálcio mitocondrial no fígado

Project title: Energy Metabolism Regulation by Mitochondrial Calcium ion Transport in the Liver

Área de atuação: Metabolismo Energético

Working area: Energy Metabolism

Quantidade de vagas: 1

Number of places: 1

Pesquisador principal: Alicia Kowaltowski

Principal investigator: Alicia Kowaltowski

Unidade/Instituição: Departamento de Bioquímica, USP

Unit/Instituition: Departamento de Bioquímica, USP

Data limite para inscrições: 01/03/2021

Deadline for submissions: 2021-03-01

Publicado em: 01/02/2021

Publishing date: 2021-02-01

Localização: Av. Prof Lineu Prestes, 748, São Paulo

Locale: Av. Prof Lineu Prestes, 748, São Paulo

E-mail para inscrições: alicia@iq.usp.br

E-mail for proposal submission: alicia@iq.usp.br

  • Resumo Summary

    As enzimas da matriz mitocondrial têm atividades aumentadas pelo Ca2+ in vitro. Propomos verificar se a fosforilação oxidativa é modulada por Ca2+. Isso será testado em fígado, uma vez que ocorre neste tecido uma rica regulação metabólica pelo Ca2+. O Ca2+ será adicionado com ou sem inibição do uniporter de cálcio mitocondrial e parâmetros bioenergéticos serão monitorados. Esses experimentos determinarão se o Ca2+ modula a fosforilação oxidativa, o que surpreendentemente não foi verificado até o momento. As taxas respiratórias também serão determinadas pela análise de Seahorse Extracellular Flux em hepatócitos modulando as atividades de MCU e NCLX, para determinar o papel do transporte mitocondrial de Ca2+ na fosforilação oxidativa in vivo.

    Além de possivelmente regular atividades específicas das vias metabólicas mitocondriais, a captação mitocondrial de Ca2+ altera a dinâmica de Ca2+ citosólica e também pode influenciar o metabolismo citosólico. Assim, investigaremos a influência do transporte mitocondrial de Ca2+ na atividade metabólica celular. Taxas de oxidação de lipídios, glicose e glutamina serão determinadas pela análise de Seahorse Extracellular Flux. Os resultados serão corroborados por medições dos níveis de fosforilação das principais enzimas regulatórias metabólicas e quantificações de NA(P)D+/NAD(P)H, lactato, glutamato, glicogênio e principais espécies de lipídeos.

    Para se candidatar à vaga, candidatos devem enviar curriculum vitae e uma carta de interesse para o e-mail alicia@iq.usp.br.

    A vaga está aberta a brasileiros e estrangeiros. O selecionado receberá Bolsa de Pós-Doutorado da FAPESP no valor de R$ 7.373,10 mensais e Reserva Técnica equivalente a 10% do valor anual da bolsa para atender a despesas imprevistas e diretamente relacionadas à atividade de pesquisa.

    Mitochondrial matrix enzymes have activities increased by Ca2+ in vitro. We propose to verify if oxidative phosphorylation supported by different substrates is modulated by Ca2+. This will be tested in isolated liver, since a rich metabolic regulation by Ca2+ occurs in this tissue. Ca2+ will be added with or without mitochondrial calcium uniporter inhibition, and bioenergetic parameters will be monitored. These experiments will determine if Ca2+ modulates oxidative phosphorylation, which surprisingly has not been verified to date. Respiratory rates will also be determined by Seahorse Extracellular Flux analysis in hepatocytes modulating MCU and NCLX activities, to determine the role of mitochondrial Ca2+ transport on oxidative phosphorylation in vivo.

    In addition to possibly regulating specific mitochondrial metabolic pathway activities, mitochondrial Ca2+ uptake changes cytosolic Ca2+ dynamics, and may also influence cytosolic metabolism. We will thus investigate the influence of mitochondrial Ca2+ transport on cellular metabolic activity. The relative oxidation rates of lipids, glucose and glutamine will be determined by Seahorse Extracellular Flux analysis. Results will be corroborated by measurements of phosphorylation levels of key metabolic regulatory enzymes and quantifications of NA(P)D+/NAD(P)H, lactate, glutamate, glycogen and major lipid species.

    The fellow will be based in the Department of Biochemistry, Chemistry Institute, University of São Paulo, Brazil.

    To apply, candidates must send a CV and a letter of interest to alicia@iq.usp.br.

    This opportunity is open to candidates of any nationalities. The selected candidate will receive a Post-Doctoral fellowship from the São Paulo Research Foundation (FAPESP) in the amount of R$ 7,373.10 monthly and a research contingency fund, equivalent to 10% of the annual value of the fellowship which should be spent in items directly related to the research activity.