Bolsa de PD em Neurociência

Post-doctoral Fellowship in Neuroscience

Nº: 2541

Área de conhecimento: Morfologia

Field of knowledge: Morphology

Nº do processo FAPESP: 2018/07592-4

FAPESP process: 2018/07592-4

Título do projeto: Papel dos mecanismos de controle de qualidade na perda da proteostase em doenças neurodegenerativas dependentes da idade

Project title: The role of quality control mechanisms in the loss of proteostasis in age-dependent neurodegenerative diseases

Área de atuação: Neurociências

Working area: Neuroscience

Quantidade de vagas: 1

Number of places: 1

Início: 01/03/2019

Start: 2019-03-01

Pesquisador principal: Merari F.R. Ferrari

Principal investigator: Merari F.R. Ferrari

Unidade/Instituição: Instituto de Biociências - USP

Unit/Instituition: Instituto de Biociências - USP

Data limite para inscrições: 15/01/2019

Deadline for submissions: 2019-01-15

Publicado em: 29/11/2018

Publishing date: 2018-11-29

Localização: Rua do Matão, 277, Instituto de Biociências - USP, São Paulo

Locale: Rua do Matão, 277, Instituto de Biociências - USP, São Paulo

E-mail para inscrições: merari@usp.br

E-mail for proposal submission: merari@usp.br

  • Resumo Summary

    Uma vaga de pós-doutorado para pesquisador está disponível para o projeto "Papel dos mecanismos de controle de qualidade na perda da proteostase em doenças neurodegenerativas dependentes da idade" conduzido no laboratório da Professora Merari F. R. Ferrari, no Instituto de Biociências da Universidade de São Paulo (campus São Paulo).

    O foco do laboratório é o estudo da biologia celular do neurônio durante a neurodegeneração. O trabalho em questão utilizará uma combinação de abordagens incluindo: cultura de células (primária, fibroblastos e células-tronco), análise in vivo, clonagem, fisiologia neuronal, biologia molecular e celular de neurônios, bem como agregação protéica relacionada à neurodegeneração.

    Sobre o projeto

    O pós-doutorando estabelecerá neurônios dopaminérgicos derivados de iPS de pacientes com Doença de Parkinson (DA), bem como de controles. O pós-doutorando também estabelecerá culturas primárias de neurônios hipocampais de camundongos transgênicos com DA.

    Essas células serão submetidas à análise da dinâmica intracelular e cross-talk entre ER e Mitocôndrias. Para detectar o movimento mitocondrial e o movimento de vacúolos autofágicos em células vivas, serão utilizadas probes fluorescentes. Para estudar os movimentos do ER dependentes de microtúbulos, as células serão co-transfectadas com GFP-tubulina e pDSRed2-ER.

    A avaliação microscópica será complementada com a quantificação dos níveis de proteína, por Western blot, de STIM1, EB1 e CLIMP63 (envolvidos na dinâmica de ER mediado por MT) e atlastin-1 (regula a fusão ER). Para estudar a interação ER-mitocôndrias, as células serão co-transfectadas com mito-GFP e pDSRed2-ER. Os contatos ER-mitocôndrias também serão analisados por meio de microscopia eletrônica e confocal de super-resolução.

    A transferência de cálcio entre o RE e as mitocôndrias desempenha um papel fundamental na vida de numerosos tipos de células e é perturbada em vários distúrbios neurodegenerativos, como as doenças de Alzheimr e de Parkinson. O transporte de Ca2+ do ER para as mitocôndrias será realizado usando sondas e microscopia confocal.

    O próximo conjunto de experimentos será realizado para avaliar o efeito da privação de nutrientes na agregação de proteínas, função mitocondrial e ER, dinâmica, tráfego e cross-talk em neurônios derivados de iPS e neurônios de camundongos transgênicos para a doença de Alzheiner, conforme técnicas detalhadas no parágrafo anterior.

    Período do contrato e início do projeto

    A duração da bolsa é de 30 meses, com início em 1º de março de 2019.

    Valores e condições

    1. Mensalidade (isenta de tributos) de R $ 7.373,10, acrescida de 15% do valor anual para despesas relacionadas à pesquisa (Reserva Técnica);
    2. Apoio financeiro para despesas de viagem e instalação pode ser solicitado para o candidato selecionado que mora fora de São Paulo, o mérito será avaliado pela FAPESP após a aceitação do estipêndio;
    3. O candidato deve ter completado o doutorado há não mais de três anos antes da inscrição;
    4. O bolsista não deve ter nenhum emprego formal ou informal, nem receber outra bolsa, salário ou remuneração devido às suas atividades de qualquer natureza.

    Para mais detalhes, acesse: http://www.fapesp.br/270 

    Como se inscrever

    O prazo para inscrição é 15 de janeiro de 2019, exclusivamente por email (merari@usp.br). Inclua como assunto "Pós-doutorado", seguido do seu nome. A inscrição deve incluir os seguintes documentos (arquivos em formato PDF):

    1. Um texto em inglês, com no máximo 2 páginas, explicando suas motivações para trabalhar neste projeto;
    2. CV lattes atualizado (brasileiros) ou CV resumido (máximo de 3 páginas), incluindo trabalhos publicados atestando sua adequação para realizar o projeto;
    3. Duas cartas de recomendação enviadas diretamente pelos escolhidos pelo candidato para o email indicado acima.

    Seleção

    A seleção será feita com base no CV do candidato, quando será analisada a experiência na área de pesquisa do projeto e qualidade das publicações, motivação e cartas de recomendação.

    Os candidatos podem ser convidados para uma entrevista pessoal ou via Skype. Os candidatos receberão a lista de classificação por e-mail até o final de janeiro de 2019. O candidato selecionado deve apresentar os documentos necessários para a solicitação de bolsa da FAPESP no prazo máximo de 15 dias após sua aprovação. 

    A Post-doctoral Fellow position for a highly motivated researcher is available in Prof. Merari F. R. Ferrari Laboratory at the Institute of Biosciences of the University of São Paulo (campus São Paulo).

    Our Laboratory is interested in studying cell biology of neurodegenerative diseases.

    The focus of the work will be a combination of approaches including: cell culture (primary, fibroblast and stem cell), in vivo analysis, cloning, neuron physiology, molecular and cell biology of neuron, as well as protein aggregation related with neurodegeneration.

    For more information about the University of São Paulo, visit: https://www5.usp.br/#english.

    About the project

    Post-doctoral fellow will establish dopaminergic neurons derived from iPS of PD patients as well as from controls. Epidermal fibroblasts from patients diagnosed with Parkinson's disease as well as from controls were purchased from the Coriell Institute and reprogrammed to hiPS cells. These cells will be characterized and differentiated into midbrain dopaminergic neurons. The Postdoc fellow will also establish primary cultures of hippocampal neurons from AD transgenic mice.

    These cells will be subjected to the analysis of intracellular dynamics, trafficking and cross-talk between ER and Mitochondria. To detect mitochondrial movement and autophagic vacuoles movement he will use live-cell imaging using MitoTracker Green FM (Invitrogen) and using Cyto-ID™ Autophagy detection kit (Enzo, Lausen, Switzerland), respectively.

    To study Microtubules (MT)-dependent ER movements, cells will be co-transfected with GFP-tubulin (to visualize MT) and pDSRed2-ER (to visualize ER dynamics), on gridded coverslips. Microscopic evaluation will be complemented with quantification of protein levels, by Western blot, of STIM1, EB1 and CLIMP63 (involved in MT-mediated ER dynamics) and atlastin-1 (regulates ER fusion).

    To study ER-mitochondria interaction cells will be co-transfected with mito-GFP (to visualize mitochondria) and pDSRed2-ER (to visualize ER). ER-mitochondria contacts will be also analyzed through electron microscopy. Transfer of calcium between the ER and mitochondria plays a key role in the life of numerous cell types and it is disrupted in several neurodegenerative disorders, namely AD. Ca2+ shuttling from ER to mitochondria will be carried out using fluorescent probes as Fura-2AM (Sigma) and a motorized Zeiss LSM 510 confocal microscopy Meta/UV microscope with Axiovert 200.

    The next set of experiments will be performed in order to evaluate starvation effect on protein aggregation, mitochondrial and ER function, dynamics, trafficking and cross-talk in iPS-derived neurons and neurons from AD transgenic mice, techniques to measure these parameters were as detailed in the previous paragraph.

    Contract period and project start

    The scholarship duration is 30 months, starting in March 1st, 2019.

    Values and conditions

    1. Monthly grant (free of taxes) of BRL 7,373.10, plus 15% of the annual value for expenses related to the research (Technical Reserve);
    2. Financial support for travel and installation expenses may be requested for the selected applicant who lives out of São Paulo and the merit will be evaluated by FAPESP upon acceptance of the stipend;
    3. The candidate must have completed the PhD no longer than three years prior to application;
    4. The grantee must not have any formal or informal employment, nor receive during the stipend a fellowship of another agency, salary or remuneration due to his/her activities of any nature.

    For more details, visit: http://www.fapesp.br/en/5427.

    How to apply

    The submission deadline is January 15th, 2019. Registration exclusively by email (merari@usp.br). Include as subject "Post-doctoral position", followed by your name. The application must include the following documents (Files in PDF format):

    1. A text in English, with a maximum of 2 pages, explaining your motivations to work on this project;
    2. CV lattes updated (Brazilian) or Summarized CV (maximum 3 pages), including published papers attesting your suitability to carry out the project;
    3. Two letters of recommendation sent directly by the referees to the email indicated above.

    Selection

    The selection will be made based on the CV of the candidate (experience in the area of research of the project and quality of publications), motivation and recommendation letters. Applicants might be invited to a personal interview or via Skype. Candidates will receive the selection list (classification) by email until the end of January, 2019. The selected candidate must submit the necessary documents for FAPESP scholarship application within 15 days of his/her approval.